Стерилизација у аутоклаву укључује три различите фазе:
Уклањање ваздуха: У овој почетној фази, аутоклав уклања ваздух из коморе. Вакум пумпа усисава ваздух, стварајући окружење ниског притиска. Овај корак обезбеђује да пара може ефикасно да продре у све области и достигне терет за одговарајућу стерилизацију.
Стерилизација: Када се ваздух уклони, температура унутар аутоклава достиже тачан ниво. Засићена пара, настала под притиском, убија бактерије, вирусе и друге микроорганизме. Уобичајена температура за стерилизацију је 121 степен при притиску од 1,1 килограм/квадратни центиметар (кг/цм²) (еквивалентно 15 фунти/квадратни инч (лб/ин²)). Трајање аутоклавирања варира у зависности од запремине оптерећења, али се генерално сматра да износи 15-20 минута.
Хлађење/сушење: Након стерилизације, пара се ослобађа, а аутоклав се хлади. Када је температура безбедна, врата се отварају и стерилисани предмети су спремни за употребу.
Ефикасно уклањање ваздуха, правилно позиционирање предмета и адекватно време загревања су кључни за успешну стерилизацију у аутоклаву.